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2023年11月24日 14:16 來源 :威九國際生物科技(重慶)有限公司
在多肽熒光標記中 ,通常其熒光分子的使用量是蛋白標記使用量的數十倍 ,甚至百餘倍 ,比如想拿到5mg 95%熒光標記的多肽 ,至少需要200mg或300mg熒光分子 。
多肽熒光標記通常在多肽合成過程中 ,就已經標記上 ,此時其他所有活性基團均被保護起來 ,所以多肽的熒光標記是非常精準的定點標記 ,最後再通過HPLC純化 ,提高被標記肽的純度至95%以上或98%以上 。
打個比方
:比如一段序列使用FITC標記
序列為
:H2N-D1-A2-G3-L4-E5-K6-G7-V8-K9-COOH
序列中有3個氨基 ,均可分別標記上FITC ,如
標記在N端氨基上 :FITC-D1-A2-G3-L4-E5-K6-G7-V8-K9
K6的側鏈氨基上 :D1-A2-G3-L4-E5-K6(FITC)-G7-V8-K9
K9的側鏈氨基上 :D1-A2-G3-L4-E5-K6-G7-V8-K9(FITC)
多肽熒光標記後 ,通常會采用高濃度三氟乙酸處理 ,處於強酸環境中 ,然後通過HPLC純化 。
威九國際生物科技(重慶)有限公司
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